電穿孔儀電轉杯主要由兩個扁平的電極,一個帶有過濾功能并且散布有直徑大約為100nm納米孔的碳酸脂膜(PC膜)以及一個用來支撐兩個電極的支撐部分組成,在使用新裝置進行生物大分子的轉化時,先將需要傳遞的試劑加到底部的鈦電極上,之后立即將帶有膜的支撐部分放置到底部電極之上,接著第二片鈦電極被放到整個裝置的頂部,給兩個電極之間施加電脈沖,使細胞膜上形成納米孔,生物大分子得以進入細胞內部。
電穿孔儀電轉杯為一次性消耗品,實際上維護得好的話可以多次重復使用為提高重復使用壽命,請大家注意:
1、電轉杯的電極為鋁合金制作,會與鹽酸劇烈反應,腐蝕電極表面。而破損的電極表面既不利于消毒,也會影響電轉效率。同樣的原因,也不允許用堿液(鋁與強堿反應)、次氯酸鈉溶液(強酸性)浸泡處理。可以在實驗室里看到許多電極上布滿坑洞的舊電轉杯,就是酸處理的結果,請大家將這些都丟棄掉。
2、不要將電轉杯長期在水或酒精溶液中浸泡保存。鋁的性質活躍,在水中長期浸泡會形成氫氧化鋁膠體并逐漸腐蝕,同時易滋生細菌。而浸泡于酒精溶液僅能抑菌,并不能阻止腐蝕,時間長了酒精揮發(fā)散失依然會長菌。另一個問題是酒精溶液長期浸泡會導致電轉杯的硬質聚碳酸酯外殼碎裂,因而也應避免。
3、電轉的關鍵是高場強,所以要求體系中的離子濃度盡可能低,避免“短路”和電擊穿,這也是制備電擊感受態(tài)時要求反復用去離子水重懸浸洗菌體的原因所在。所以為了提高場強也為了增加工作面積,同樣的,電擊之前也要注意擦干電轉杯外表面的水份,防止高壓擊穿損壞。