電穿孔儀工作時(shí),會(huì)在含有細(xì)胞的介質(zhì)中施加一個(gè)短時(shí)的、高強(qiáng)度的電場(chǎng)。這個(gè)電場(chǎng)通常由電極產(chǎn)生,電極間的距離和電場(chǎng)強(qiáng)度都是可以調(diào)節(jié)的參數(shù)。在電場(chǎng)作用下,細(xì)胞膜上的磷脂分子頭部朝向電場(chǎng)的負(fù)極,而疏水的尾部則朝向正極,這種重新排列導(dǎo)致膜的穩(wěn)定性下降,從而形成孔洞。這些孔洞是動(dòng)態(tài)的,它們?cè)陔妶?chǎng)作用后不久就會(huì)自行封閉??锥吹拇嬖跁r(shí)間通常很短,從幾毫秒到幾秒不等,具體時(shí)間取決于電場(chǎng)的強(qiáng)度、持續(xù)時(shí)間以及細(xì)胞類(lèi)型。
電穿孔儀有多種類(lèi)型,包括批量電穿孔和單細(xì)胞電穿孔,開(kāi)放式電穿孔器和封閉式電穿孔器,以及指數(shù)衰減電穿孔器和方波電穿孔器。其基本組件包括電源、脈沖發(fā)生器、比色皿和電極。電源提供電能以產(chǎn)生電場(chǎng),脈沖發(fā)生器控制脈沖的幅度、持續(xù)時(shí)間和頻率,比色皿用于容納細(xì)胞和分子,電極用于向細(xì)胞傳遞電脈沖。
電穿孔儀在基因轉(zhuǎn)染、細(xì)胞融合、藥物遞送等多個(gè)實(shí)驗(yàn)情境中有廣泛應(yīng)用。例如,在基因轉(zhuǎn)染中,電穿孔技術(shù)能夠在短時(shí)間內(nèi)使細(xì)胞膜形成大量的孔隙,提高了基因?qū)氲男?;在?xì)胞融合中,電穿孔技術(shù)可以促進(jìn)不同細(xì)胞之間的融合,為研究細(xì)胞間的相互作用和跨物種基因交流提供了新的途徑;在藥物遞送中,電穿孔技術(shù)可以提高藥物的遞送效率,尤其是對(duì)于一些難透膜的藥物。
電穿孔技術(shù)具有靈活、適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn),但也存在需要仔細(xì)優(yōu)化參數(shù)、可能對(duì)細(xì)胞造成損傷等缺點(diǎn)。因此,在使用電穿孔儀時(shí),需要根據(jù)具體的實(shí)驗(yàn)需求和細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的電場(chǎng)參數(shù),并嚴(yán)格控制操作條件以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。