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摘要本研究旨在探討基于葉綠體轉化的三角褐指藻外源蛋白表達技術，通過構建葉綠體表達載體并利用電穿孔法導入外源基因，成功在三角褐指藻中表達了CAT和GFP蛋白。該技術具有高效、穩(wěn)定和安全的特點，為生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品提供了新的平臺，具有廣闊的應用前景。引言三角褐指藻（Phaeodactylumtricornutum）是一種重要的海洋硅藻，具有培養(yǎng)簡單、成本低廉和不含內(nèi)毒素等優(yōu)點，作為生物反應器具有顯著的優(yōu)勢。然而，傳統(tǒng)的核基因轉化方法在三角褐指藻中的外源基因表達效率較低，且存在位置效...

摘要：本研究旨在通過電穿孔轉化技術將重組質(zhì)粒導入沙眼衣原體（CT），構建基于CT的載體系統(tǒng)，并探索其在真核宿主細胞中的遺傳與表達。實驗采用2.5kV電壓電擊處理CT和重組質(zhì)粒，結果顯示外源質(zhì)粒能成功導入CT并隨其遺傳復制，但未在CT中表達。本研究為沙眼衣原體載體系統(tǒng)的制備提供了試驗依據(jù)和方法模型。引言沙眼衣原體（Chlamydiatrachomatis，CT）作為一種重要的致病菌，廣泛存在于人類泌尿生殖系統(tǒng)中，是引起非淋菌性尿道炎、宮頸炎等多種疾病的主要病原體。近年來，隨著基...

摘要本文詳細探討了影響電穿孔法轉化大腸桿菌的各類因素，包括電場參數(shù)、細胞狀態(tài)、DNA質(zhì)量等，并通過實驗驗證了最佳轉化條件。結果表明，優(yōu)化電穿孔條件能顯著提高轉化效率，為基因工程研究提供了可靠的技術支持。引言微生物細胞作為自然界廣泛存在且功能多樣的微小生命體，其細胞膜天然具備選擇透過性，嚴格調(diào)控物質(zhì)進出，保障細胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)并限制外界物質(zhì)侵入。突破這層屏障，精準、高效調(diào)控細胞內(nèi)外物質(zhì)交換，挖掘微生物潛能，一直是科研攻堅的重點。電穿孔技術作為一種新興的物理方法，巧妙利用電場脈沖改變細胞...

摘要本文詳細闡述了柔嫩艾美耳球蟲ADF重組卡介苗的構建及其免疫保護性研究。通過RT-PCR技術擴增ADF基因，并克隆至卡介苗表達載體中，構建了重組卡介苗pMV261-ADF和pMV361-ADF。實驗結果顯示，重組卡介苗通過滴鼻免疫方式具有顯著的抗球蟲效果，為雞球蟲病的預防提供了新的策略。引言雞球蟲病是一種由艾美耳屬球蟲寄生在雞的腸道引起的寄生性原蟲病，其中柔嫩艾美耳球蟲（Eimeriatenella）是最主要的病原體之一。該病分布廣泛，感染率高達60%～70%，死亡率可超過...

摘要：本文介紹了一種新型的高通量小間距細胞電穿孔裝置，采用電絕緣的聚氯乙烯（PVC）薄膜制作，電極間距為80μm。該裝置不僅顯著降低了細胞電穿孔所需的電壓，提高了實驗操作的安全性，還實現(xiàn)了高通量操作，提升了實驗效率。盡管電穿孔轉化效率有所降低，但通過進一步優(yōu)化實驗參數(shù)，該裝置在基因工程領域具有廣闊的應用前景。引言細胞電穿孔技術，又稱電轉染技術，是一種常用的細胞轉染方法。該技術通過施加一定的電場強度可逆地擊穿細胞膜，在細胞膜上形成小孔或通路，從而將遺傳物質(zhì)引入細胞內(nèi)。自1982...

摘要：本文研究了借助電穿孔法將綠色熒光蛋白（GFP）基因?qū)肴毡狙x童蟲的技術，并驗證了其表達。通過優(yōu)化電穿孔條件，實現(xiàn)了高效的基因轉染，為血吸蟲基因功能研究及潛在的基因治療提供了新途徑。實驗結果顯示，導入的GFP基因在血吸蟲童蟲體內(nèi)成功表達，表現(xiàn)出綠色熒光。引言：血吸蟲病是一種嚴重危害人類健康的寄生蟲病，主要通過接觸含有血吸蟲尾蚴的疫水傳播。血吸蟲生活史復雜，包括成蟲、蟲卵、毛蚴、胞蚴、尾蚴和童蟲等多個階段。血吸蟲病的防治關鍵在于理解其發(fā)育過程及基因功能。然而，由于血吸蟲...

摘要：本研究利用電穿孔法將水牛脂肪干細胞（BASC）和成纖維細胞（BFF）進行基因轉染，通過優(yōu)化電穿孔參數(shù)，實現(xiàn)了高效的基因?qū)搿嶒灲Y果顯示，電穿孔法對早期代數(shù)細胞具有較高的轉染效率和相對存活率，為水牛相關基因功能研究和疾病治療提供了有力支持。引言電穿孔法（Electroporation），又稱電轉染，是一種利用短暫高電壓脈沖在細胞膜上形成暫時孔道，從而實現(xiàn)外源DNA等大分子物質(zhì)進入細胞內(nèi)部的基因轉染技術。通過調(diào)節(jié)電場強度、脈沖時間和脈沖次數(shù)等參數(shù)，可以將外源DNA導入真核...

摘要：本文詳細探討了電穿孔技術在介導小干擾RNA（siRNA）高效轉染小鼠胚胎中的應用。通過優(yōu)化透明帶弱化程度、電壓、脈沖時間和脈沖次數(shù)等條件，結合不同介質(zhì)作為電轉緩沖液，實現(xiàn)了siRNA簡便、高效地轉染小鼠附植前胚胎。本研究為基因功能研究提供了有力的技術參考。引言：近年來，小干擾RNA（siRNA）介導的RNA干擾（RNAi）技術已成為研究基因功能的重要工具。siRNA通過特異性降解靶mRNA，抑制其表達，從而實現(xiàn)基因沉默，為研究基因在生物體發(fā)育和疾病發(fā)生中的作用提供了強有...