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3-19
摘要多藥耐藥基因(MDR1)轉(zhuǎn)染至細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK),探索其耐藥性增強機制及臨床應用潛力。實驗采用電穿孔技術實現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染,并通過體外耐藥性評估和動物模型驗證功能。結果顯示,轉(zhuǎn)染后CIK細胞對化療藥物的耐受性顯著提升,同時維持抗腫瘤活性。研究為優(yōu)化腫瘤聯(lián)合治療方案提供了實驗依據(jù)。引言腫瘤化療的療效常因多藥耐藥性(MDR)而受限,MDR1基因編碼的P-糖蛋白可通過外排藥物降低細胞內(nèi)藥物濃度。細胞因子誘導的殺傷細胞(CIK)作為一種過繼性免疫治療手段,在實體瘤治療中展...
3-19
摘要GAD65基因在神經(jīng)遞質(zhì)合成中具有重要作用,但其對神經(jīng)干細胞分化的調(diào)控機制尚不明確。GAD65過表達/敲低的神經(jīng)干細胞模型,結合體外分化誘導體系,系統(tǒng)分析了GAD65對細胞增殖、分化的影響。實驗采用威尼德電穿孔儀進行基因編輯,結合免疫熒光染色及qPCR技術檢測分化標志物表達。結果表明,GAD65通過調(diào)控Wnt/β-catenin信號通路影響神經(jīng)干細胞向GABA能神經(jīng)元分化,為神經(jīng)退行性疾病治療提供了新思路。引言γ-氨基丁酸(GABA)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì),...
3-19
摘要磁性殼聚糖納米載體構建了一種高效、低毒的eNOS基因遞送系統(tǒng),用于血管平滑肌細胞的靶向轉(zhuǎn)染。通過優(yōu)化載體制備工藝,結合磁靶向技術,顯著提升了基因轉(zhuǎn)染效率并降低細胞毒性。實驗結果表明,該載體可實現(xiàn)eNOS基因的穩(wěn)定表達,且對細胞活性無顯著影響,為心血管疾病的基因治療提供了新策略。引言血管平滑肌細胞(VSMCs)的異常增殖與遷移是動脈粥樣硬化、支架內(nèi)再狹窄等心血管疾病的核心病理機制。內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)可通過催化一氧化氮(NO)生成,抑制VSMCs過度增殖并改善血管...
3-19
摘要HBV全基因質(zhì)粒并轉(zhuǎn)染人滋養(yǎng)細胞,利用膠體金探針標記技術追蹤HBsAg的表達與定位。實驗采用威尼德電穿孔儀完成細胞轉(zhuǎn)染,結合免疫熒光及透射電鏡觀察HBsAg動態(tài)分布。結果表明,膠體金探針可高效示蹤HBsAg的胞內(nèi)轉(zhuǎn)運路徑,為HBV感染機制研究提供可視化技術手段。引言乙型肝炎病毒(HBV)感染是導致慢性肝炎、肝硬化和肝癌的主要病因之一。HBsAg作為HBV的主要表面抗原,其表達與分泌機制對病毒傳播及宿主免疫逃逸至關重要。目前,針對HBsAg的示蹤研究多依賴熒光標記技術,但存...
3-18
摘要轉(zhuǎn)染SCF基因至NK細胞系,探討其對細胞增殖、細胞毒性及遷移能力的影響。采用威尼德電穿孔儀完成基因?qū)?,結合流式細胞術、CCK-8法和Transwell實驗評估功能變化。結果顯示,SCF轉(zhuǎn)染顯著增強NK細胞增殖活性(p引言自然殺傷(NK)細胞作為先天免疫系統(tǒng)的重要組成部分,在腫瘤免疫監(jiān)視和抗病毒感染中發(fā)揮關鍵作用。然而,NK細胞在體外擴增效率低、存活時間短等問題限制了其臨床應用。干細胞因子(SCF)是一種多功能細胞因子,通過與c-Kit受體結合,參與造血干細胞存活、增殖及...
3-18
摘要雙順反子表達載體,實現(xiàn)兩種功能基因的協(xié)同表達,并優(yōu)化細胞轉(zhuǎn)染與分選流程。利用威尼德電穿孔儀完成高效轉(zhuǎn)染,結合熒光標記與流式分選技術,驗證載體在哺乳動物細胞中的表達效率。實驗結果表明,雙順反子載體顯著提高共表達效率,為多基因功能研究提供可靠工具。引言雙順反子載體因其可同時表達多個基因的特性,在基因治療、信號通路研究及合成生物學領域備受關注。傳統(tǒng)單順反子載體需多次轉(zhuǎn)染或復雜拼接,效率低且穩(wěn)定性差。本研究旨在設計一種基于內(nèi)部核糖體進入位點(IRES)或自切割多肽(P2A)的雙順...
3-18
摘要cMet基因的siRNA慢病毒載體,并通過穩(wěn)定轉(zhuǎn)染篩選獲得高效抑制cMet表達的細胞模型。實驗采用分子克隆技術設計特異性siRNA序列,利用威尼德電穿孔儀完成病毒包裝,經(jīng)熒光標記篩選及Westernblot驗證,成功獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞系。結果顯示,cMet蛋白表達顯著降低,為后續(xù)功能研究提供了可靠工具。引言cMet基因編碼的肝細胞生長因子受體(HGFR)在腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及耐藥性中發(fā)揮關鍵作用。其異常激活與多種癌癥不良預后密切相關,因此靶向cMet的基因沉默技術成為研究熱點。...
3-18
摘要:分子克隆技術構建人CD160基因過表達載體,利用威尼德電穿孔儀轉(zhuǎn)染HEK293T及Jurkat細胞系,篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細胞株。通過流式細胞術、CCK-8增殖實驗及Transwell遷移模型系統(tǒng)分析CD160對細胞增殖、凋亡及遷移能力的影響。結果顯示CD160過表達顯著抑制T淋巴細胞活化并促進腫瘤細胞遷移,Westernblot證實其通過調(diào)控PI3K/AKT信號通路發(fā)揮作用,為免疫調(diào)控機制研究提供新模型。引言:CD160作為免疫球蛋白超家族成員,在T/B淋巴細胞表面特異性...